Últimos Adicionados
SHOPPING BAG
Nenhum produto no carrinho.
Bem-vindo à Cellco
Pfu DNA Polymerase

Fabricante

Cellco Biotec
Código Nome do Produto Apresentação Preço Qtd Disponibilidade
POL-104XS Pfu DNA Polymerase - XS Pack 100 unidades
R$360,94
Disponível em estoque

POL-104S Pfu DNA Polymerase - S Pack 500 unidades
R$577,50
Disponível em estoque

POL-104M Pfu DNA Polymerase - M Pack 1.000 unidades
R$924,00
Disponível em estoque

POL-104L Pfu DNA Polymerase - L Pack 2 x 1.000 unidades
R$1.478,40
Disponível em estoque

POL-104XL Pfu DNA Polymerase - XL Pack 4 x 1.000 unidades
R$2.365,44
Disponível em estoque

DNA polimerase com atividade proofreading - elevada acurácia


Pyrococcus furiosus, recombinante, E. coli

 

Pfu DNA Polimerase

Pfu Pol é a escolha ideal para aplicações onde a eficiência na amplificação e elevada fidelidade são necessárias. A enzima catalisa a polimerização de nucleotídeos na fita dupla de DNA na direção 5' → 3' mas não possui ativididade 5' → 3' exonuclease. Sua atividade proofreading 3 '→ 5' resulta em elevada fidelidade na síntese de DNA comparada com a Taq DNA Polimerase. Pfu Pol gera fragmento de PCR não coesivos (blunt). A enzima é altamente purificada e livre de DNA bacteriano.

Definição de unidade

Uma unidade é definida como a quantidade de enzima requerida para catalisar a incorporação de 10 nmoles de dNTPs em uma forma ácido-insolúvel em 30 minutos a 70 °C.

 

CONTEÚDO

Pfu Pol (blue cap)

2.5 unidades/µL Pfu DNA polimerase em 20 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.5% Tween-20, 0.5% Nonidet P-40, 50% glicerol (v/v), pH 8.0 (25 °C)

 

Pfu Reaction Buffer complete 10x (red cap)

200 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 100 mM (NH4)2SO4, 20 mM MgSO4, 1% *(v/v) Triton X-100, 1 mg/mL BSA, pH 8.8 (25 °C)

 

PROTOCOLO

Apenas para uso in vitro!

Ensaio recomendado: 50 µL

Volume [ final ] Componente
5 µL 1 X 10x Pfu Reaction Buffer complete (red cap)
1 µL 200 µM 10 mM dNTPs
1 µL 0.2 µM 10 µM Oligonucleotídeo senso
1 µL 0.2 µM 10 µM Oligonucleotídeo antisenso
variável 50 pg - 1 µg DNA molde
0.5 - 2 µL 1.25 - 5 unidades Pfu Pol (blue cap)
q.s.p 50 µL Água grau PCR

 

Condições de ciclagem recomendadas

Denaturação inicial 95 °C 1-3 min 1 X
Denaturação 95 °C 15-30 s 25-30 X
Hibridização1 45-70 °C 15-30 s
Elongação2 72 °C 1 min/kb
Elongação final 72 °C 1-2 min/kb 1 X

1 A temperatura de hibridização depende da temperatura denaturação (melting) do oligonucleotídeo empregado.

2 O tempo de elongação depende do tamanho do fragmento que se pretende amplificar. Recomenda-se 1 min por kb.

 

TRANSPORTE E ARMAZENAGEM

Transportado em blue ice

Armazenada à -20 °C.

 

DOCUMENTOS

MANUAIS E PROTOCOLOS

 Pfu Pol - Manual (En)

Voltar ao topo

- Lysis Buffer (com indicador de pH);
- Neutralization Buffer (adicionar RNAse A antes do uso e armazenar à 4°C);
- RNase A (armazenar à -20°C);
- Activation Buffer;
- Washing Buffer (adicionar Etanol 96-99%, conforme indicação);
- Elution Buffer;
- Binding Columns;
- 2 mL Collection Tubes.
Temperatura ambiente
Temperatura ambiente (exceto RNAse – armazenada à -20°C)
Manual 1
Manual 2
Manual 3