Detecção por SYBR®Green
A linha Cellco de qPCR SybrMaster foi projetada para análise quantitativa de PCR em tempo real de amostras de DNA. As misturas contêm todos os reagentes necessários para qPCR (exceto DNA molde e primers) em uma solução pré-mix 2x concentrada pronta para uso. As misturas são recomendadas para aplicações de PCR de rotina, PCR de alto rendimento ou genotipagem e proporcionam uma maior especificidade e sensibilidade ao amplificar alvos com baixo número de cópias ou ao trabalhar com DNA moldes complexos.
O corante fluorescente de DNA SYBR® Green intercala-se no produto de amplificação durante o processo de PCR e permite a quantificação direta do DNA alvo sem a necessidade de sondas marcadas específicas da sequência (por exemplo, sondas TaqMan®).
A análise de High Resolution Melting (HRM) é uma ferramenta poderosa para a detecção de mutações, polimorfismos e diferenças epigenéticas em amostras de DNA. É uma alternativa rápida e econômica a outras tecnologias de genotipagem.
A enzima UNG (Uracil-N-Glycosylase) elimina a contaminação cruzada de DNA de reações anteriores de PCR. Um tratamento com UNG no início do ciclo térmico remove os resíduos de uracil do DNA contendo dU e impede que ele sirva como modelo.
O corante de referência ROX não participa da reação de PCR, mas permite a normalização da variação de sinal não relacionada à PCR.
O corante fluorescente SYBR® Green é um corante intercalador de DNA superior especialmente desenvolvido para aplicações de análise de DNA, incluindo PCR em tempo real (qPCR). Ao se ligar ao DNA, o corante não fluorescente torna-se altamente fluorescente e não apresenta inibição detectável no processo de PCR. O corante é extremamente estável, proporcionando praticidade durante o manuseio de rotina. Em contraste com o EvaGreen®, o SYBR® Green não é recomendado para análise de curva de fusão de alta resolução (HRM).
Produtos
EvaGreen® é uma marca registrada e licenciada para venda pela Biotium, Inc., Hayward, CA, EUA.
SYBR® é uma marca registrada da Invitrogen Corporation, Carlsbad, Califórnia, EUA.