Amplificação Isotérmica de DNA

Ao contrário da PCR, a amplificação isotérmica mediada por loop LAMP possibilita a amplificação de DNA à temperatura constante de 60-65 °C sem a necessidade de um termociclador. A reação é feita com a enzima Bst polimerase, que apresenta atividade de deslocamento de fita e é capaz de gerar fragmentos de DNA já a partir de 10 min de reação a um fator de 109, o que equivale a 30 ciclos de PCR.

Além disso, a amplificação por LAMP tem a vantagem de ser mais adequada ao uso com amostras complexas, como por exemplo provindas de sangue ou plantas, pelo fato da Bst polimerase ser mais resistente a inibidores do que a Taq polimerase. Isso possibilita a detecção de genes alvos de amostras minimamente processadas, tornando-se o método de escolha quando se tem a necessidade de analisar rapidamente diferentes amostras. O método no entanto pode se mostrar limitado para análises quantitativas de precisão ou amplificação de diferentes genes alvos em um único tubo (multiplexing).

A reação também pode ser realizada na presença de uma enzima com atividade de transcrição reversa – RT-LAMP, mostrando-se extremamente eficiente para a detecção de fragmentos de amostras de RNA provindas de diferentes espécimes.

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