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Taq High Fidelity Pol

Fabricante

Cellco Biotec
Código Nome do Produto Apresentação Preço Qtd Disponibilidade
POL-106XS Taq High Fidelity Polymerase - XS Pack 250 unidades
R$126,40
Disponível em estoque

POL-106S Taq High Fidelity Polymerase - S Pack 500 unidades
R$202,27
Disponível em estoque

POL-106M Taq High Fidelity Polymerase - M Pack 1.000 unidades
R$323,62
Disponível em estoque

POL-106L Taq High Fidelity Polymerase - L Pack 2 x 1.000 unidades
R$517,80
Disponível em estoque

POL-106XL Taq High Fidelity Polymerase - XL Pack 4 x 1.000 unidades
R$828,47
Disponível em estoque

DNA polimerase de elevada fidelidade


Thermus sp, recombinante, E. coli

 

 

Taq High Fidelity Pol

Taq High Fidelity Pol é um mix de Taq DNA polimerase e uma enzima proofreading especialmente desenvolvida para elevada acurácia e eficiente amplificação. Apresenta resultados excelentes para amplificação extremamente longas (até 30 Kb), ricos em GC e outros moldes difíceis. A mistura enzimática conta com uma polimerase com alta processividade 5'- 3' e ausência da atividade 5' - 3' exonuclease. A presença de atividade de correção (proofreading ) 3' - 5' resulta em aumento significativo da fidelidade durante a síntese de DNA comparado com a Taq DNA polimerase. A enzima é altamente purificada e livre de DNA bacteriano.

Definição de unidade

Uma unidade é definida como a quantidade de enzima requerida para catalisar a incorporação de 10 nmoles de dNTPs em uma forma ácido-insolúvel em 30 minutos a 70 °C.

 

CONTEÚDO

Taq High Fidelity Pol (blue cap)

5 unidades/µL High Fidelity Polymerase em 20 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.5% Tween-20, 0.5% Nonidet P-40, 50% Glicerol (v/v). pH 8.0 (25 °C)

 

High Fidelity Buffer (red cap)

200 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 100 mM (NH4)2SO4, 20 mM MgSO4, 1% *(v/v) Triton X-100, 1 mg/mL BSA, pH 8.8 (25 °C)

 

PROTOCOLO

Apenas para uso in vitro!

Ensaio recomendado: 50 µL

Volume [ final ] Componente
5 µL 1 X 10x High Fidelity Buffer (red cap)
1 µL 200 µM 10 mM dNTPs
1 µL 0.2 - 0.5 µM 10 µM Oligonucleotídeo senso
1 µL 0.2 - 0.5 µM 10 µM Oligonucleotídeo antisenso
variável 10 pg - 1 µg DNA molde
0.25 - 0.5 µL 1.25 - 5 unidades Taq High Fidelity Pol (blue cap)
q.s.p 50 µL Água grau PCR

Condições de ciclagem recomendadas

Denaturação inicial 95 °C 1 - 3 min 1 X
Denaturação 95 °C 15 - 30 s 25-35 X
Hibridização1 45 - 70 °C 15 - 30 s
Elongação2 72 °C 1 min/kb
Elongação final 72 °C 1 min/kb 1 X

1 A temperatura de hibridização depende da temperatura denaturação (melting) do oligonucleotídeo empregado.

2 O tempo de elongação depende do tamanho do fragmento que se pretende amplificar. Recomenda-se 1 min por kb.

 

TRANSPORTE E ARMAZENAGEM

Transportado em blue ice

Armazenada à -20 °C.

 

DOCUMENTOS

MANUAIS E PROTOCOLOS

 Taq High Fidelity Pol - Manual (En)

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- Lysis Buffer (com indicador de pH);
- Neutralization Buffer (adicionar RNAse A antes do uso e armazenar à 4°C);
- RNase A (armazenar à -20°C);
- Activation Buffer;
- Washing Buffer (adicionar Etanol 96-99%, conforme indicação);
- Elution Buffer;
- Binding Columns;
- 2 mL Collection Tubes.
Temperatura ambiente
Temperatura ambiente (exceto RNAse – armazenada à -20°C)
Manual 1
Manual 2
Manual 3