DESCRIÇÃO
Taq Pol Master Mix 2X Green contém Taq DNA Polimerase em tampão otimizado contendo Mg2+ e dNTPs. O master mix é suplementado com corantes de rastreamento para carregamento direto dos produtos de PCR em geis de eletroforese. Contém todos os reagentes requeridos para realização da PCR (com exceção dos oligonucleotídeos e DNA molde) em forma de mix 2X concentrado e pronto para uso. Deve ser empregado na concentração de 1X em reações de de 25 a 50 µL. O Master mix é recomendado para reações de PCR rotina a partir de soluções puras de DNA, colônias bacterianas e cDNA. É otimizado para alta especificidade, garantido o mínimo de formação de subprodutos. Os corantes de rastreamento empregados não interferem na performance da reação de PCR e são compatíveis com aplicações posteriores, tais como, sequenciamento ligação ou reações de digestão.
CONTEÚDOVoltar ao topo
Taq Pol Master Mix 2X Green (tampa verde)
Master mix contendo DNA polimerase termoestável, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, KCl, MgCl2, corante, tampão de carregamento e estabilizantes.
PROTOCOLOVoltar ao topo
Apenas para uso in vitro!
Ensaio recomendado: 50 µL
| Componente | [ final ] | Volume |
| Taq Pol Master Mix 2X Green | 25 µL | 1 X |
| 10 µM Oligonucleotídeo senso | 1 µL | 0.2 µM |
| 10 µM Oligonucleotídeo antisenso | 1 µL | 0.2 µM |
| DNA molde | variável | 10 pg - 1 µg** |
| Água grau PCR | q.s.p 50 µL | |
**DNA genômico: 1 ng-1μg; DNA plasmidial ou viral: 1 pg-1 ng
Condições de ciclagem recomendadas
| Denaturação inicial | 95 °C | 1 min | 1 X |
| Denaturação | 95 °C | 15-30 s | 30 X |
| Hibridização1 | 45-68 °C | 15-30 s | |
| Elongação2 | 72 °C | 30 s - 4 min | |
| Elongação final | 72 °C | 2 min | 1 X |
1 A temperatura de hibridização depende da temperatura denaturação (melting) do oligonucleotídeo empregado.
2 O tempo de elongação depende do tamanho do fragmento que se pretende amplificar. Recomenda-se 1 min por kb.
TRANSPORTE E ARMAZENAGEMVoltar ao topo
Transportado em blue ice
Armazenada à -20 °C. Evite ciclos de congelamento/descongelamento.
Taq Pol Master Mix 2X é estável por até 3 meses a 4ºC
DOCUMENTOSVoltar ao topo
MANUAIS E PROTOCOLOS
- Neutralization Buffer (adicionar RNAse A antes do uso e armazenar à 4°C);
- RNase A (armazenar à -20°C);
- Activation Buffer;
- Washing Buffer (adicionar Etanol 96-99%, conforme indicação);
- Elution Buffer;
- Binding Columns;
- 2 mL Collection Tubes.
Temperatura ambiente (exceto RNAse – armazenada à -20°C)
Manual 2
Manual 3
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