Detecção por Corante de DNA

A linha Cellco de qPCR StainMaster foi projetada para análise quantitativa de PCR em tempo real de amostras de DNA. As misturas contêm todos os reagentes necessários para qPCR (exceto DNA molde e primers) em uma solução pré-mix 2x concentrada pronta para uso. As misturas são recomendadas para aplicações de PCR de rotina, PCR de alto rendimento ou genotipagem e proporcionam uma maior especificidade e sensibilidade ao amplificar alvos com baixo número de cópias ou ao trabalhar com DNA moldes complexos.

O corante utilizado é um corante intercalador de DNA superior especialmente desenvolvido para aplicações de análise de DNA, incluindo PCR em tempo real (qPCR) sem inibir a PCR. Ao se ligar ao DNA, o corante não fluorescente torna-se altamente fluorescente e permite a quantificação direta do DNA alvo sem a necessidade de sondas marcadas específicas da sequência (por exemplo, sondas TaqMan®). O corante é extremamente estável, proporcionando praticidade durante o manuseio de rotina.

A enzima UNG (Uracil-N-Glycosylase) elimina a contaminação cruzada de DNA de reações anteriores de PCR. Um tratamento com UNG no início do ciclo térmico remove os resíduos de uracil do DNA contendo dU e impede que ele sirva como modelo.

O corante de referência ROX não participa da reação de PCR, mas permite a normalização da variação de sinal não relacionada à PCR.