Cap Analogs – Enhance mRNA stability and translation efficiency

Muitos mRNAs eucarióticos e virais são modificados em suas extremidades 5' pela adição de 7-Metilguanosina (N7-metil guanosina ou m7G), conhecida como "Cap". O "capsulamento" da estrutura do mRNA desempenha uma função crucial em uma variedade de processos celulares que incluem o início da tradução[1], o splicing[2], o transporte intracelular[3] e o turnover[4]. Em geral, os mRNAs com capa são traduzidos com mais eficiência em sistemas de tradução in vitro de germe de trigo e reticulócitos[5] e são menos suscetíveis à degradação por exonuclease durante experimentos de microinjeção em comparação com mRNAs sem capa[6].

Os análogos de cap são incorporados enzimaticamente na extremidade 5' do RNA pela transcrição in vitro mediada pela polimerase de RNA do bacteriófago T7.

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Selected References

[1] Gingras et al. (1999) eIF4 initiation factors: Effectors of mRNA recruitment to ribosomes and regulators of translation. Annu. Rev. Biochem. 68:913.
[2] Izaurralde et al. (1994) A nuclear cap binding protein complex involved in pre-mRNA splicing. Cell 78:657.
[3] Izaurralde et al. (1992) A cap binding protein that may mediate nuclear export of RNA polymerase II-transcribed RNAs. J. Cell Biol. 118:1287.
[4] Beelman et al. (1998) An essential component of the decapping enzyme required for normal rates of mRNA turnover. Nature 382:642.
[5] Paterson et al. (1979) Efficient translation of prokaryotic mRNAs in a eukaryotic cell-free system requires addition of a cap structure. Nature 279:692.
[6] Drummond et al. (1985) The effect of capping and polyadenylation on the stability, movement and translation of synthetic messenger RNAs in Xenopus oocytes. Nucl. Acids Res. 13:375.
[7] Pasquinelli et al. (1995) Reverse 5' caps in RNAs made in vitro by phage RNA polymerases. RNA 1:957.
[8] Grudzien et al. (2007) Synthesis of Anti-Reverse Cap Analogs (ARCAs) and their Applications in mRNA Translation and Stability. Methods Enzymol. 431:203.